Kurzbeschreibung
Das NanoTemper Monolith Pico Red ist ein auf der MicroScale-Thermophorese (MST) basierendes Gerät, das für die Quantifizierung biomolekularer Wechselwirkungen in Lösung unter nahezu nativen Bedingungen entwickelt wurde. Es ermöglicht die schnelle Bestimmung von Bindungsaffinitäten über einen breiten dynamischen Bereich von Pikomolar- bis Millimolar-Konzentrationen. MST ist eine Technik zur Messung der Bewegung von Molekülen in einem Temperaturgradienten, die als Thermophorese bezeichnet wird und von der Größe der Ladung und der Hydratationsschale der Moleküle abhängt. Wenn ein Molekül einem Temperaturgradienten ausgesetzt wird, bewegt es sich je nach seinen Eigenschaften in Richtung kühlere oder wärmere Regionen, und diese Bewegung kann durch Beobachtung der Fluoreszenzänderung eines markierten Moleküls nachgewiesen werden.
Bei der MST wird ein fluoreszierend markiertes Zielmolekül einem Temperaturgradienten ausgesetzt und die Veränderung seines Wanderungsmusters wird in Echtzeit verfolgt. Wenn ein Ligand an das Zielmolekül bindet, verändert er dessen thermophoretisches Verhalten, was zu einer messbaren Verschiebung des Fluoreszenzsignals führt. Dies ermöglicht die Bestimmung der Bindungsaffinität, der Stöchiometrie und der Kinetik molekularer Wechselwirkungen, ohne dass eine komplexe Markierung oder Oberflächenimmobilisierung erforderlich ist.
Ansprechperson
Sebastian Glatt
Research Services
MicroScale Thermophoresis (MST), RNA- und Protein Interaktionsmessungen
Methoden & Expertise zur Forschungsinfrastruktur
MST ist eine Technik zur Messung der Bewegung von Molekülen in einem Temperaturgradienten, die als Thermophorese bezeichnet wird und von der Größe der Ladung und der Hydratationsschale der Moleküle abhängt.
Dmytrenko O, Yuan B, Crosby KT, Krebel M, Chen X, Nowak JS, Chramiec-Głąbik A, Filani B, Gribling-Burrer AS, van der Toorn W, von Kleist M, Achmedov T, Smyth RP, Glatt S, Bravo JPK, Heinz DW, Jackson RN, Beisel CL.
Nature. 2026 Jan;649(8099):1312-1321. doi: 10.1038/s41586-025-09852-9. Epub 2026 Jan 7.
PMID: 41501459
https://www.nature.com/articles/s41586-025-09852-9
Queuosine is incorporated into precursor tRNA before splicing.
Guo W, Kaczmarczyk I, Kopietz K, Flegler F, Russo S, Cigirgan E, Chramiec-Głąbik A, Koziej Ł, Cirzi C, Peschek J, Reuter K, Helm M, Glatt S, Tuorto F.
Nat Commun. 2025 Jul 31;16(1):7044. doi: 10.1038/s41467-025-62220-z.
PMID: 40745156
https://www.nature.com/articles/s41467-025-62220-z
Structural and biochemical characterization of the 3'-5' tRNA splicing ligases.
Chamera S, Zajko W, Czarnocki-Cieciura M, Jaciuk M, Koziej Ł, Nowak J, Wycisk K, Sroka M, Chramiec-Głąbik A, Śmietański M, Gołębiowski F, Warmiński M, Jemielity J, Glatt S, Nowotny M.
J Biol Chem. 2025 May;301(5):108506. doi: 10.1016/j.jbc.2025.108506. Epub 2025 Apr 10.
PMID: 40220997
https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0021-92582500355-2
The molecular basis of tRNA selectivity by human pseudouridine synthase 3.
Lin TY, Kleemann L, Jeżowski J, Dobosz D, Rawski M, Indyka P, Ważny G, Mehta R, Chramiec-Głąbik A, Koziej Ł, Ranff T, Fufezan C, Wawro M, Kochan J, Bereta J, Leidel SA, Glatt S.
Mol Cell. 2024 Jul 11;84(13):2472-2489.e8. doi: 10.1016/j.molcel.2024.06.013.
PMID: 38996458
https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S1097-27652400520-3