Kurzbeschreibung
Durch das durchgeführte Upgrade wurde das vorhandene Thermo Fisher Scientific / FEI Talos L120C G2 Transmissionselektronenmikroskop um einen Gatan ELSA 698.STP Kryo-Transferhalter, eine zugehörige Pumpstation sowie EPU-Software für automatisierte Datenerfassung erweitert und damit für Kryo-EM-Anwendungen ausgebaut. Der Kryo-Halter ermöglicht die frostfreie Überführung gefrorener Suspensionen oder Kryo-Schnitte bei Temperaturen unter -170 °C in das TEM und gewährleistet durch vollständige Kühlung der Halterspitze stabile Probentemperaturen, geringe Drift und reproduzierbare Bildgebung. Mit der integrierten Temperaturüberwachung und der Gatan 655 Pumpstation kann ein sauberes, trockenes Hochvakuum für den Kryo-Betrieb bereitgestellt und die Performance des Halters langfristig sichergestellt werden. Das Vergrößerungskalibrierungspaket erlaubt eine semi-automatisierte Kalibrierung der eingebetteten Digitalkamera und stellt korrekte Maßstabsbalken und verzerrungsfreie STEM-Bilder sicher, was für quantitative Analysen essentiell ist. Die EPU-Software mit zugehöriger Lizenz bietet einen benutzerfreundlichen Workflow zur automatisierten Aufnahme von Single-Particle-Datensätzen, inklusive Atlas-Erstellung, Auswahl geeigneter Messbereiche und automatisierter Bildakquisition.
In Kombination mit der bestehenden Expertise in TEM-Betrieb, Probenpräparation und Datenanalyse erweitert das Upgrade die Forschungsinfrastruktur um vollwertige Kryo-EM-Funktionalität für strukturelle Biologie, Biomedizin, Makromolekül- und Nanopartikelanalytik sowie für kooperative Projekte mit akademischen und industriellen Partnern.
Ansprechperson
Dr. rer. nat. Arndt Rohwedder
Research Services
Für Details kontaktieren Sie bitte die verantwortliche Person.
Methoden & Expertise zur Forschungsinfrastruktur
Die durch das Upgrade eingerichtete Kryo-TEM-Infrastruktur auf Basis des Thermo Fisher Scientific / FEI Talos L120C G2 ermöglicht Methoden der Kryo-Transmissionselektronenmikroskopie für gefroren-hydrierte Proben sowie Kryo-Ultradünnschnitte. In Kombination mit dem Gatan-Kryo-Transferhalter werden gefrorene Suspensionen (z.B. Viren, Proteinkomplexe, Nanopartikel) oder Kryo-Schnitte bei tiefen Temperaturen in das TEM überführt, wodurch Strukturanalysen bei weitgehend erhaltener nativer Organisation möglich werden. Die vorhandene EPU-Software erlaubt eine automatisierte, standardisierte Datenerfassung (z.B. Single-Particle-Datensätze) über Atlas-Aufnahmen, Auswahl geeigneter Messbereiche und templatebasierte Bildaufnahme.
Das betreuende Team verfügt über extensive Erfahrung in TEM-Betrieb, konventioneller Probenpräparation (Fixierung, Einbettung, Ultradünnschnitte) sowie in der Etablierung und Optimierung von Kryo-Workflows. Dazu zählen u.a. die Auswahl geeigneter Vitrifizierungs- und Probenvorbereitungsstrategien, die Anpassung von Aufnahmeparametern für hochauflösende Struktur- und Morphologieanalysen sowie die Auswertung der Bilddaten in Kooperation mit Fachgruppen aus Biologie, Medizin und Materialwissenschaften. Die Infrastruktur eignet sich für kooperative Projekte in struktureller Biologie, Immunologie, Zell- und Gewebebiologie, Biomaterial- und Nanopartikelforschung und unterstützt sowohl methodische Entwicklung als auch Schulungs- und Trainingstätigkeiten im Bereich der (Kryo-)TEM.